Cultures cellules humaines

Objectifs

À l’issue de l’atelier en biotechnologies, vous aurez acquis les connaissances nécessaires pour :
maîtriser les bases de la culture cellulaire (cellules saines et cancéreuses) ;

  • maîtriser les matériels spécifiques à la culture de cellules ;
    mener un travail expérimental en biologie cellulaire et culture de cellules humaines pour effectuer des tests ;
  • maintenir une culture en conditions optimales sur le long terme (sécurité, propreté, stérilité, éviter la dérive génétique…) ;
  • être critique sur l’organisation et la réalisation d’un protocole expérimental ;
  • analyser un problème en termes de classes et d’objets ;
  • réfléchir/analyser de façon critique des résultats expérimentaux.

PUBLIC

Salariés, demandeurs d’emploi se destinant à un poste de :

  • technicien spécialisé en culture cellulaire en laboratoire académique ou privé, milieu hospitalier, pharmacologie, cosmétologie… ;
  • technicien de laboratoire, assistant ingénieur ou ingénieur dans le domaine de la biologie ou biochimie ;
  • ingénieurs biologistes ou biochimistes qui souhaiteraient développer et manipuler la culture cellulaire.

PRÉ-REQUIS

  • Niveau bac +1 scientifique en biologie ou biochimie et expérience significative dans le domaine.
  • Bases de la biologie cellulaire
  • Esprit logique structuré et organisé
  • Respect des règles de sécurité en laboratoire
  • Maîtrise de l’anglais souhaité

Contenus

Cet atelier comprend 3 volets réalisés sur plusieurs lignées cellulaires permettant l’acquisition des bases théoriques et pratiques de la culture de cellules humaines.


Le travail pratique comprend :

  • l’hygiène et sécurité (pour le manipulateur/auteur et l’échantillon) ;
  • la constitution de milieux de culture ;
  • la division de cellules par « trypsinisation » (décollement des cellules par utilisation de la trypsine) ;
  • le comptage en hémocytomètre ;
  • l’ensemencement à densité connue ;
  • un test de prolifération cellulaire ;
  • une analyse de la migration en transwells (comparaison du pouvoir migratoire des cellules)
    la microscopie à fluorescence ;
  • test de contamination par des mycoplasmes pour le maintien de la culture dans des conditions de stérilité (réalisation du test, détection des mycoplasmes…) ;
  • congélation/décongélation de cellules ;
  • test de viabilité cellulaire (compréhension de l’intérêt comptage colorimétrique des cellules mortes parmi les vivantes, calcul du taux de mortalité, de la mort cellulaire).

modalités PéDAGOGIQUEs

Atelier intégré au groupe de formation initiale du master 1 Biotechnologies ou possibilité de groupes spécifiques entreprises
L’atelier est composé de 5 heures de théorie intégrative et 30 heures de pratique. Le travail est individuel pendant tout l’atelier et est accompagné par le responsable pédagogique.
Il s’agit d’un travail expérimental, sur une durée de 5 jours, en salle de culture et biologie cellulaire complètement équipée. Le matériel nécessaire est mis à disposition. Chaque participant réalise l’ensemble des expériences.
Les participants sont également amenés à faire des recherches bibliographiques sur des techniques précises de culture cellulaire et une étude comparative par rapport à leurs propres résultats expérimentaux.
Évaluation des manipulations pratiques scientifiques et du compte-rendu écrit de l’ensemble de l‘atelier, rédigé par chaque participant.

Matériels utilisés

  • Postes de Sécurité Microbienne de type II (hotte à flux laminaire vertical)
    Incubateur à CO2
  • Microscopes droit, inversé et à fluorescence
  • Centrifugeuses
  • Matériel de congélation
  • Pompes aspirantes
  • Hémocytomètres
  • Bain-marie